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CLFP熒光染料用于觀察活細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞多核化及細(xì)胞核片段化現(xiàn)象新方法

DATE:2016-09-08    來(lái)源:齊一生物科技(上海)有限公司    點(diǎn)擊數(shù):

細(xì)胞多核化及細(xì)胞核片段化現(xiàn)象與染色體不穩(wěn)定性相關(guān),在癌癥研究中具有普遍而重要的研究?jī)r(jià)值。目前的觀察方法是采用細(xì)胞核染料(如:DAPI、姬姆薩)進(jìn)行染色,直接觀察細(xì)胞核的狀態(tài)。但是,細(xì)胞核染色的方法不利于區(qū)分細(xì)胞邊界,難以區(qū)分不同細(xì)胞核是否位于同一細(xì)胞內(nèi)。另外,細(xì)胞核染色不能提供核片段邊界清晰的圖像,無(wú)法對(duì)細(xì)胞核片段進(jìn)行計(jì)數(shù)。因此,開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)便、有效、尤其是可量化的評(píng)估細(xì)胞多核化及細(xì)胞核片段化的方法,具有重大的科研價(jià)值,將為癌癥染色體不穩(wěn)定相關(guān)研究提供極大的便利。

中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所天然藥物活性物質(zhì)與功能?chē)?guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的尹大力課題組、陳曉光課題組采用自主研發(fā)的細(xì)胞質(zhì)特異性定位熒光染料(Cytoplasm-localized Fluorescent Probes, CLFP)建立了一種適用于觀察活細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞多核化及細(xì)胞核片段化現(xiàn)象的新方法。這一方法只需將CLFP熒光染料與細(xì)胞孵育10分鐘,即可在熒光顯微鏡下觀察是否存在多細(xì)胞核現(xiàn)象。更重要的是CLFP方法染色圖像能夠提供清晰的細(xì)胞核及核片段的邊緣,從而可以對(duì)于細(xì)胞核片段化現(xiàn)象進(jìn)行量化評(píng)估。CLFP熒光染料從多種熒光母核結(jié)構(gòu)制備優(yōu)化,滿足研究中對(duì)于熒光顏色、染料毒性的不同需求。

 

相關(guān)方法已經(jīng)在Analyst雜志上報(bào)道,通訊作者崔華清副研究員得到了北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院協(xié)和青年科研基金(33320140176),中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)(2014RC01)及國(guó)家自然科學(xué)基金青年科研基金(81402785)的資助開(kāi)展該項(xiàng)研究。山東中醫(yī)藥大學(xué)的科研人員也參與項(xiàng)目研究。


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